Um microscópio de luz transmitida ilumina a preparação por baixo, fazendo passar a luz através dela para permitir uma observação detalhada. Estes microscópios são frequentemente utilizados em áreas como biologia, medicina, ciência dos materiais e investigação.
O microscópio de luz transmitida pertence à categoria dos microscópios óticos, que produzem imagens ampliadas dos objetos através da refração da luz em várias lentes de vidro. A sua utilização está limitada a objetos suficientemente transparentes. Em muitas análises, é necessário preparar previamente os objetos, cortando-os, corando-os ou submetendo-os a outros tratamentos, para obter imagens elucidativas.
Antes de comprar um microscópio de luz transmitida, deve considerar a sua principal finalidade de utilização. Os requisitos para atividades de lazer são diferentes dos exigidos na investigação profissional.
Ao comprar um microscópio de luz transmitida, é importante considerar não só as funções básicas, como ampliação, iluminação e focagem, mas também os recursos adicionais que podem tornar o microscópio mais versátil e eficaz.
Estas funcionalidades são especialmente relevantes para a utilização profissional na investigação, medicina ou análise de materiais, pois permitem examinar e documentar amostras com maior precisão.
Existem diversas tecnologias que melhoram significativamente a visualização dos objetos através de iluminação especial ou de outros recursos. Entre elas encontram-se o campo escuro, o contraste de fase, a polarização e a formação de imagens multidimensionais, brevemente explicados a seguir.
Num microscópio de luz transmitida convencional, a luz é direcionada por baixo, atravessando a amostra até à objetiva. A lâmina e os componentes da preparação que retêm pouca luz aparecem claros na imagem observada através das oculares.
Por este motivo, este princípio também é designado por microscopia de campo claro. Em contraste, na microscopia de campo escuro, o objeto em análise aparece sobre um fundo escuro. Isto permite distinguir estruturas finas e transparentes muito melhor do que sobre um fundo claro.
O fundo escuro é obtido direcionando a iluminação de modo que a luz não entre diretamente na objetiva. Apenas os raios desviados pela amostra e dispersos em direção à objetiva contribuem para formar uma imagem clara e de elevado contraste sobre o fundo escuro.
As partes de um objeto com poucas diferenças de luminosidade e cor são difíceis de identificar e avaliar, mesmo com elevada ampliação. No entanto, se essas partes ou regiões apresentarem densidades óticas diferentes, a luz que atravessa a região mais densa chega mais tarde à objetiva.
Com elementos adicionais específicos, esta diferença de tempo, ou diferença de fase, é convertida numa diferença de luminosidade na imagem ampliada. O microscópio de luz transmitida com contraste de fase mantém a mesma facilidade de utilização e permite obter elevada resolução e bom contraste, sem necessidade de corar as amostras.
Ao propagarem-se no espaço, as ondas luminosas podem oscilar em diferentes direções relativamente ao eixo de propagação. A polarização pode ser utilizada para deixar passar apenas determinadas componentes da luz e bloquear outras através de filtros.
Quando a luz atravessa certas substâncias, a sua direção de polarização altera-se de forma característica. Assim, a luz que normalmente seria bloqueada consegue atravessar o filtro. Estas regiões aparecem claras e coloridas na imagem, enquanto as restantes permanecem escuras.
Um microscópio de luz transmitida com filtro de polarização permite avaliar determinadas amostras de forma rápida e simples em medicina, geologia e ensaios de materiais.
Para obter imagens microscópicas ampliadas em três dimensões, são necessárias duas objetivas dispostas com um ligeiro desfasamento entre si. Num microscópio digital de luz transmitida, as duas imagens são sobrepostas num monitor e, em alguns casos, só podem ser visualizadas em três dimensões com óculos 3D.
Num microscópio de luz transmitida puramente ótico, também designado por estereomicroscópio, as imagens das objetivas são encaminhadas separadamente para a ocular direita e para a esquerda. A observação simultânea das duas imagens ligeiramente desfasadas produz o efeito de profundidade.
Para obter um efeito tridimensional no microscópio de luz transmitida, as amostras devem ser suficientemente transparentes e apresentar uma estrutura definida.
Ampliação
Como em qualquer microscópio, a ampliação é uma das características mais importantes de um microscópio de luz transmitida. Muitas vezes, as ampliações adequadas podem ser definidas claramente em função da aplicação.
A maior ampliação possível nem sempre é a melhor opção, pois reduz a área visível.
Por este motivo, a maioria dos microscópios dispõe de vários níveis de ampliação, que podem ser selecionados conforme necessário. Quando estes níveis não são indicados diretamente, podem ser calculados multiplicando a ampliação da ocular pela ampliação da objetiva.
A abertura numérica da objetiva
Como os objetos são ampliados para tornar os detalhes visíveis, não só o fator de ampliação, mas também a resolução da imagem ampliada é de importância decisiva. Na microscopia, o poder de resolução é indicado pela abertura numérica da objetiva.
A abertura numérica máxima possível é de 0,95 no caso habitual em que existe ar entre a lente da objetiva e o objeto ou a respetiva lamela. Quanto maior for o valor da abertura numérica, melhor será a resolução e mais elementos poderão ser distinguidos na imagem.
Opções de equipamento num microscópio digital de luz transmitida
Os microscópios digitais permitem visualizar imagens em monitores de grandes dimensões, editá-las e guardá-las em formato digital. A própria visualização num monitor de grandes dimensões já oferece inúmeras vantagens.
Na seleção, deve considerar-se não só o monitor incluído, mas sobretudo as interfaces, as características da câmara, a resolução das imagens e dos vídeos digitais e as funções do software disponibilizado.
